凍存管又稱菌種保存管、磁珠保存管、磁珠凍存管。微生物實驗室常用的菌種保存方法有牛奶法、甘油法、斜面法等。復雜程度各異,效果也差別很大。目前國內的大多數實驗室都是實驗人員自行制作菌種保存管,這不僅增大了工作強度,并且由于各種條件的限制,菌種保存效果不能總是令人滿意。所以,這就需要掌握好凍存管的使用方法和一些注意事項,這樣才能起到很大的作用。
一、使用方法
1、使用凍存管儲存樣本時,嚴格要求應把凍存管放入液氮的氣相層或冰箱中保存。如果凍存管儲存于液氮液體中,液氮有一定幾率會滲入凍存管內部,復蘇時液氮氣化導致管內外壓力不平衡,這樣極易造成凍存管的炸裂,并具有生物危害性。
2、操作凍存管復蘇,全程使用安全防護設備,建議穿實驗服、戴棉質手套且在安全的實驗臺上進行操作。條件允許情況下,請佩戴護目鏡或防護面罩。由于夏季室內溫度會高于冬季,請格外小心。
3、凍存細胞儲存過程中,凍存管的冷凍溫度須均勻。不均勻的受凍將會導致冰塞的產生,冰塞會抑制兩側的液體溫度傳遞進而產生危險的高壓力并導致凍存管受損。
4、凍存的樣本量不要超過凍存管要求的最大工作體積。
二、注意事項
1、凍存管保存環境
未經使用的凍存管可在室溫或2-8℃保存12個月;已經接種的凍存管在-20℃保存,12個月內可有良好的菌株保存效果;已經接種的凍存管在-80℃保存,24個月內可有良好的菌株保存效果。
2、凍存管保存時間
未經使用的凍存管可在室溫或2-8℃保存;已經接種的凍存管在-20℃或-80℃保存。
3、凍存管的使用步驟
從細菌純培養物中挑取新鮮培養物配成大約為3-4麥氏比濁度的菌懸液接種與菌種保存管中;擰緊保存管,來回顛倒4-5次使細菌乳化,不能旋搖;把保存管放入冰箱保存(-20℃--70℃)。
三、重要提醒
1、需在生物安全柜中操作,確保操作的無菌,確保菌株不被污染。
2、凍存管中小瓷珠的顏色可能有所不同,這不代表任何產品功能的不同,只是方便用戶進行細菌編碼、標記。
3、在接種之前有如下情況產生,該凍存管不得使用:
a. 瓶子有漏液情況發生。
b. 凍存管內的凍存保護液混濁(說明已經被污染)。
c. 超過有效保存期。
4、小瓷珠一旦從凍存管中取出,不得以任何原因再放回凍存管中。
5、當丟棄使用過的或部分使用過的凍存管時,應注意生物危害的預防。